การวิเคราะห์ด้วยเทคนิค HPLC (High-Performance Liquid Chromatography) หรือเครื่องโครมาโทรกราฟีชนิดของเหลวประสิทธิภาพสูง ถือเป็นเครื่องมือที่มีความสำคัญ และมีการใช้กันอย่างแพร่หลาย โดยเฉพาะในอุตสาหกรรมยา อาหาร และในการวิจัยทางวิทยาศาสตร์ที่ต้องการความแม่นยำ
โดยในบทความนี้เอเพกซ์จะอธิบายเกี่ยวกับหลักการทำงาน ประโยชน์ และการประยุกต์ใช้งานของ HPLC เพื่อให้คุณเข้าใจมากยิ่งขึ้น
HPLC หรือที่ย่อมาจาก High-Performance Liquid Chromatography เป็นเทคนิคทางโครมาโตมากราฟีที่ใช้ในการแยก วิเคราะห์ และระบุองค์ประกอบของสารประกอบในตัวอย่างของเหลว โดยอาศัยหลักการแยกสารผ่านกระบวนการดูดซับ และกระจายตัวของสารในคอลัมน์ (Column) ซึ่งประกอบด้วย 2 เฟส (Phase) ที่สำคัญ คือ
1. Stationary Phase (เฟสคงที่) : ส่วนสารที่ถูกตรึงอยู่กับที่ในคอลัมน์หรือบนพื้นผิวรองรับ โดยเมื่อสารตัวอย่างผ่านเข้าไปในคอลัมน์ เฟสคงที่จะทำหน้าที่ดึงดูดหรือจับสารที่ต้องการแยกออกจากกัน
2. Mobile Phase (เฟสเคลื่อนที่) : ของเหลวที่ไหลผ่าน เฟสคงที่ (Stationary Phase) ซึ่งมีบทบาทสำคัญในการพาสารตัวอย่างผ่านคอลัมน์ เพื่อให้เกิดการแยกสารอย่างมีประสิทธิภาพ
Mobile Phase ประกอบด้วย ตัวทำละลาย (Solvent) ซึ่งเป็นองค์ประกอบสำคัญที่ช่วยเพิ่มประสิทธิภาพในการแยกสาร ทั้งในด้านการควบคุมการโต้ตอบระหว่างตัวอย่าง และคอลัมน์ รวมถึงการลดสัญญาณรบกวน (Noise) เพื่อผลวิเคราะห์ที่น่าเชื่อถือ
ด้วยเหตุนี้ การเลือกใช้ Solvent ที่เหมาะสม จึงมีความสำคัญ เอเพกซ์ เคมิเคิล พร้อมนำเสนอ Solvent & Reagent HPLC Grade จาก Fisher Chemical ซึ่งเป็นแบรนด์ชั้นนำในเครือ Thermo Fisher Scientific ที่ออกแบบมาเพื่อตอบโจทย์งานวิเคราะห์ที่ต้องการความแม่นยำสูง
CAT No. | Chemical name | CAS No. | Packsize |
A452 | Methanol, 99.9+%, HPLC | 67-56-1 | 4L |
A998 | Acetonitrile >99.9%, HPLC Gradient | 75-05-8 | 2.5L, 4L |
A/0606 | Acetone 99.8+% (GLC), HPLC | 67-64-1 | 2.5L |
H302 | Hexane, HPLC | 92112-69-1 | 4L |
H/0406 | n-Hexane (95% n-Hexane approx), HPLC | 110-54-3 | 2.5L |
A451 | Iso-propyl alcohol (IPA), HPLC | 67-63-0 | 4L |
W5 | Water, HPLC | 7732-18-5 | 4L |
W/0106 | Water, HPLC Gradient | 7732-18-5 | 2.5L |
H350 | n-Heptane, HPLC | 142-82-5 | 4L |
T425 | Tetrahydrofuran 99.99+%, inhibitor-free HPLC | 109-99-9 | 4L |
E/0906 | Ethyl acetate, HPLC | 141-78-6 | 2.5L |
D/4556 | 1,4 Dioxane, HPLC | 123-91-1 | 1L |
D143 | Dichloromethane, HPLC (Methylene Chloride) | 75-09-2 | 4L |
T/3606 | Iso-Octane, HPLC (2,2,4-Trimethylpentane) | 540-84-1 | 2.5L |
M/4496 | Methyl tert-Butyl Ether, HPLC (Tert-Butyl Methyl Ether, MTBE) | 1634-04-4 | 2.5L |
T/2306 | Toluene, HPLC | 108-88-3 | 2.5L |
P/7486 | n-Propyl Alcohol, HPLC (1-Propanol, Propan-1-ol) | 71-23-8 | 2.5L |
D/4125 | Dimethyl sulfoxide, HPLC | 67-68-5 | 2.5L |
D/3846 | Dimethylformamide (DMF), HPLC | 68-12-2 | 2.5L |
T/3203 | Triethylamine, HPLC | 121-44-8 | 250ml |
T/3258 | Trifluoroacetic acid, HPLC | 76-05-1 | 100ml |
Note : โดยในการเตรียมตัวอย่าง และตัวทำละลาย จำเป็นต้องทำด้วยความระมัดระวัง เพื่อป้องกันการปนเปื้อน
ระบบ HPLC ประกอบด้วย 4 ส่วนสำคัญ ได้แก่
1. Pump : ทำหน้าที่ส่งตัวทำละลาย และควบคุมการไหลของเฟสเคลื่อนที่ (Mobile Phase)
2. Injection Valve : ใช้สำหรับฉีดสารตัวอย่างเข้าสู่คอลัมน์ (Column)
3. Column : ใช้ในการบรรจุ Stationary Phase (เฟสคงที่) เพื่อใช้แยกสารประกอบ
4. Detector : เครื่องตรวจวัดองค์ประกอบของสารที่ผ่านออกจากคอลัมน์
มีหลักการทำงานดังนี้
1. เตรียมตัวอย่าง ละลายตัวอย่างใน Mobile Phase หรือ Solvent เกรดที่เหมาะสม
2. ฉีดตัวอย่างเข้าสู่ระบบ โดยใช้ Injection Valve หรือ Autosampler เพื่อป้อนตัวอย่างเข้าสู่คอลัมน์
3. Pump ทำหน้าที่พา Mobile Phase และตัวอย่างผ่านคอลัมน์ สารแต่ละชนิดในตัวอย่างจะเคลื่อนที่ผ่านคอลัมน์ด้วยความเร็วที่แตกต่างกัน
4. การตรวจจับสาร เมื่อสารแต่ละชนิดออกจากคอลัมน์ Detector จะตรวจจับและแปลงข้อมูลเป็นพีค (Peak) บนโครมาโตแกรม (Chromatogram)
ซึ่งสารในตัวอย่างจะถูกแยกตามความเข้ากันของสารกับ Mobile Phase และ Stationary Phase โดยสารที่มีปฏิสัมพันธ์กับ Stationary Phase น้อยจะออกจากคอลัมน์ก่อน โดยแสดงผลการวิเคราะห์ในรูปแบบของ โครมาโตแกรม (Chromatogram) ซึ่งแสดงพีคของสารแต่ละชนิดตามเวลาที่ใช้ในการวิเคราะห์ สามารถใช้วิเคราะห์หาปริมาณ ความเข้มข้น และองค์ประกอบของสาร ได้อย่างแม่นยำ
ตัวอย่าง พีค (Peak) บนโครมาโตแกรม (Chromatogram)
โดยแกน X แสดงวลาในการกักเก็บ (Retention Time) ซึ่งเป็นเวลา (Minutes) ที่สารแต่ละชนิดใช้เคลื่อนที่ผ่านคอลัมน์และถูกตรวจจับโดย Detector ส่วนแกน Y แสดงค่า Intensity บ่งบอกถึงปริมาณของสารที่ถูกตรวจพบนั่นเอง
Tips : โดยตัวอย่างที่เป็นของแข็งสามารถนำไปเตรียมให้อยู่ในรูปของสารละลายก่อนทำการวิเคราะห์ได้เช่นกัน เพื่อให้การใช้งานเครื่อง HPLC มีประสิทธิภาพสูงสุด
HPLC เป็นเทคนิคสำคัญในการวิเคราะห์ที่ใช้ในหลากหลายอุตสาหกรรม การเลือกใช้ Solvent & Reagent ที่เหมาะสมกับเทคนิคที่ใช้วิเคราะห์นั้นมีความสำคัญในการเพิ่มประสิทธิภาพการแยกสาร ลดสัญญาณรบกวน และช่วยปกป้องเครื่องมือวิเคราะห์ เพื่อให้ได้ผลลัพธ์ที่แม่นยำสูงสุด
หากสนใจผลิตภัณฑ์ดังกล่าว สามารถติดต่อสอบถามได้ที่
Tel : 02-038-9999
Email : info@apexchemicals.co.th
Line : @ApexChemicals
เรามีผู้เชี่ยวชาญ ที่พร้อมบริการคุณ