
การนึ่งฆ่าเชื้อ (Autoclaving) เป็นหนึ่งในกระบวนการพื้นฐานที่มีความสำคัญในห้องปฏิบัติการ ใช้สำหรับเตรียมเครื่องแก้ว อุปกรณ์ และจัดการสารละลายหรือของเสียทางชีวภาพให้ปลอดจากการปนเปื้อน
กระบวนการนี้อาศัยไอน้ำแรงดันสูงที่อุณหภูมิประมาณ 121°C ซึ่งสามารถทำลายจุลินทรีย์
ได้อย่างมีประสิทธิภาพ อย่างไรก็ตาม เนื่องจากเกี่ยวข้องกับ ความร้อน ไอน้ำ และความดัน การใช้งานจึงต้องอาศัยความเข้าใจและความระมัดระวัง เพื่อป้องกันความเสี่ยงต่อทั้งผู้ใช้งานและอุปกรณ์
บทความนี้อ้างอิงแนวทางการใช้งานจาก Borosil Scientific เพื่อสนับสนุนความถูกต้อง ความปลอดภัย และมาตรฐานในงานห้องปฏิบัติการ
Autoclave คืออะไร และทำงานอย่างไร
Autoclave คือเครื่องนึ่งฆ่าเชื้อที่ใช้ไอน้ำแรงดันสูงในการกำจัดจุลินทรีย์ รวมถึงสปอร์ที่ทนความร้อน ถูกใช้งานอย่างแพร่หลายในงานวิจัย งานวิเคราะห์ และงานควบคุมคุณภาพ โดยสามารถใช้กับอุปกรณ์ได้หลากหลาย เช่น เครื่องแก้ว อุปกรณ์พลาสติก สารละลาย อาหารเลี้ยงเชื้อ และของเสียทางชีวภาพ
สิ่งที่ต้องรู้ก่อนใช้งาน Autoclave
ก่อนเริ่มใช้งาน ผู้ใช้งานควรตรวจสอบว่าเครื่องอยู่ในสภาพพร้อมใช้งาน และได้รับการบำรุงรักษาอย่างเหมาะสม
รวมถึงศึกษาคู่มือ (Owner’s Manual) ของเครื่องแต่ละรุ่นอย่างละเอียด เนื่องจาก Autoclave แต่ละเครื่องอาจมีรูปแบบการทำงานและข้อกำหนดที่แตกต่างกัน
นอกจากนี้ ควรปฏิบัติตามมาตรการด้านความปลอดภัยของห้องปฏิบัติการอย่างเคร่งครัด เพื่อป้องกันอุบัติเหตุจากแรงดันและไอน้ำร้อน
การนึ่งฆ่าเชื้อเครื่องแก้วเปล่า (Empty Glassware)
- วางเครื่องแก้วบนถาดที่ทนความร้อน เช่น ถาดพลาสติกหรือถาดโลหะ และไม่ควรวางเครื่องแก้วโดยตรงบนพื้นของหม้อนึ่งฆ่าเชื้อ
- จัดวางเครื่องแก้วให้มีระยะห่างอย่างน้อย 5 เซนติเมตร เพื่อให้มีพื้นที่สำหรับการขยายตัวเมื่อได้รับความร้อน และป้องกันการกระแทกกันระหว่างกระบวนการ
- เติมน้ำลงในถาดให้มีระดับประมาณ 1/4 ถึง 1/2 นิ้ว เพื่อช่วยให้ความร้อนกระจายได้อย่างสม่ำเสมอทั่วทั้งเครื่องแก้ว
- เติมน้ำกลั่นเล็กน้อยลงในเครื่องแก้วขนาดใหญ่ เช่น ขวดขนาด 3–5 ลิตร เพื่อช่วยสร้างไอน้ำและเพิ่มประสิทธิภาพการถ่ายเทความร้อน
การนึ่งฆ่าเชื้อเครื่องแก้วที่มีของเหลว (Glassware with Liquids)
การนึ่งฆ่าเชื้อเครื่องแก้วที่มีของเหลวต้องใช้ความระมัดระวังเป็นพิเศษ โดย
- ห้ามนึ่งสารกัดกร่อนหรือสารอันตรายโดยเด็ดขาด เช่น กรดหรือด่าง ตัวทำละลาย สารระเหย หรือสารกัมมันตรังสี เข้าไปนึ่งฆ่าเชื้อโดยเด็ดขาด เนื่องจากอาจก่อให้เกิดอันตรายต่อผู้ใช้งานและอุปกรณ์
- ควรเติมของเหลวไม่เกินครึ่งหนึ่งของปริมาตรภาชนะ และ คลายฝาขวดให้หลวมก่อนนำเข้าเครื่องเสมอ เพื่อป้องกันการแตกของภาชนะจากการเปลี่ยนแปลงของความดันภายในระหว่างกระบวนการ
- ควรเลือกใช้ระบบระบายอากาศแบบช้า เช่น Slow Exhaust หรือ Liquid Cool Cycle เพื่อลดความรุนแรงของการเดือดและป้องกันของเหลวล้นออกมา
- ควรทำการทดสอบ (Test run) เมื่อนึ่งของเหลวปริมาณมาก เนื่องจากของเหลวเยอะจะใช้เวลาฆ่าเชื้อนานขึ้น ควรแขวนเทอร์โมมิเตอร์ไว้กึ่งกลางของเหลวเพื่อยืนยันว่าอุณหภูมิสามารถขึ้นถึง 121°C ได้จริง
ข้อควรระวังด้านความปลอดภัย (Safety Precautions)
เพื่อความปลอดภัยในการใช้งาน Autoclave ควรปฏิบัติตามแนวทางดังนี้
✔ ข้อควรทำ (Do)
- สวมอุปกรณ์ป้องกันส่วนบุคคล (PPE) ให้ครบถ้วน
ได้แก่ เสื้อกาวน์ แว่นตานิรภัย รองเท้าหุ้มส้น และถุงมือกันความร้อนทุกครั้ง เพื่อป้องกันอันตรายจากไอน้ำและอุณหภูมิสูง -
ตรวจสอบความดันก่อนเปิดเครื่อง
ควรตรวจสอบให้แน่ใจว่าความดันลดลงเป็นศูนย์ (0) และยืนหลบด้านหลังประตู พร้อมรอให้ไอน้ำระบายออกก่อนใช้งาน
-
รอก่อนนำเครื่องแก้วออกจากเครื่อง
ควรรออย่างน้อย 5 นาที สำหรับเครื่องแก้วเปล่า และประมาณ 10–20 นาที สำหรับเครื่องแก้วที่มีของเหลว เพื่อลดความเสี่ยงจากความร้อนและการเดือดล้น -
ปล่อยให้เครื่องแก้วเย็นก่อนสัมผัส
เครื่องแก้วเปล่าควรพักให้เย็นประมาณ 15 นาที และเครื่องแก้วที่มีของเหลวควรรอประมาณ 1 ชั่วโมง เพื่อให้มั่นใจว่าอุณหภูมิอยู่ในระดับที่ปลอดภัย
✖ ข้อควรหลีกเลี่ยง (Don’t)
- ห้ามขันฝาภาชนะทันทีหลังการนึ่ง
เนื่องจากการควบแน่นของไอน้ำอาจทำให้เกิดสุญญากาศภายใน ส่งผลให้ฝาหรือภาชนะแตกเสียหายได้ - ห้ามวางเครื่องแก้วที่ยังร้อนบนพื้นผิวที่เย็น
โดยเฉพาะเครื่องแก้วขนาดใหญ่ เพราะความแตกต่างของอุณหภูมิอย่างฉับพลันอาจทำให้ภาชนะแตก และทำให้ของเหลวร้อนภายในไหลออกมา